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食用菌母種和原種菌種制作詳細的操作

時間: 2019-06-27 09:16 來源: 未知 作者: admin 點擊:
現在逐漸隨著食用菌產業的快速發展,各行業的菌種需要量就慢慢隨之增加,而目前我國菌種生產單位明顯是有點少了,許多菇農不得不向外引種。但不說長途購運菌種不僅花費大,成本高而且菌種如果因破瓶而易引起雜菌污染,從而也會嚴重影響栽培食用菌的經濟效益。菇農若能掌握菌種生產程序和制種技術,實行自行制種,逐步發展成制種專業戶,也是一項很好的致富門路。菌種生產程序,通常分為母種、原種和栽培種3個層次,也就是通常所說的一級、二級、三級菌種。其中母種的分離選育技術性強,要求精化;而原種和栽培種的制作則比較簡單。下面就由中藥標準對照品研究中心給各位介紹各級菌種的制作技術。
 
        一、母種的分離選育母種主要采用人工選擇、誘變育種、雜交育種和原生質融合等手段獲得。作為一般制種專業戶,可以采用人工選擇方式分離培育母種,具體步驟與操作方法如下。
        1、采集種源從野生成人工栽培群體中,選擇有代表性的優良菇體作為種源。種菇的標準是:八成熟,朵形圓正、肉質肥厚,無病蟲害。采集1--2朵符合上述標準的種菇編上號碼,作為分離母種的材料。從栽培室采集的應標有原菌株代號。
        2、培養基配制瓊脂培養基又叫PDA培養基,常用配方為:馬鈴薯200--250克,瓊脂15--20克,葡萄糖20--25克,清水1000毫升。也可以加硫酸鎂1--1.5克,維生素B1微量,磷酸二氫鉀2--3克。先將馬鈴薯洗凈去皮,切成薄片,置于鋁鍋內加水煮沸30分鐘,撈起后用4層紗布過濾,取汁。然后將瓊脂加入汁內,邊加熱邊攪拌,讓瓊脂充分溶化;再將葡萄糖等加入,稍煮幾分鐘后,同樣用4層紗布過濾,取其汁液。將汁液趁熱裝入玻璃試管內。裝至管長的1/5,管口用棉花塞緊,或將汁液裝入玻璃三角瓶內,裝量20毫升。然后置于高壓鍋內,在98--108千帕/厘米的壓力下滅菌30分鐘左右。滅菌后及時取出,趁熱將試管斜排于桌上,冷卻后即成為固體斜面培養基。
        3、母種分離方法有孢子彈射、組織分離和基內分離3種方法。①孢子彈射法。將種菇表面消毒,吸干水分后,將菇體懸掛于裝有瓊脂培養基的三角瓶內,讓菇體內的袍子自然散落在培養基上萌發菌絲。也可以剪取一小決菇體,貼附在試管斜面培養基表面,讓孢子散落在培養基上萌發菌絲,即能獲得母種;③組織分離法。將消毒過的種菇,在接種箱內用手從菇柄處對半解開,或用刀片切開,使菇體形成對開。在菌蓋和菌柄交界處或菌褶處,用接種刀切取一小塊菇體,然后縱切成5毫米x10毫米的小薄片,用接種針挑取一塊薄片,接入斜面培養基的中央,每支試管接種一小決薄片,待其萌發菌絲,即可得到母種;(3)基內分離法。選擇已長菇的木段,削去樹皮及表層木質部,用70%的酒精消毒后,鋸成1厘米厚的薄片,放入0.1%的 HgCl2水中消毒1--2分鐘,再用滅菌水洗去殘液。然后再將小薄片劈成0.5--1厘米寬的小條,接入斜面培養基中央,待長出菌絲后即得母種。也可以在已長菇的菌袋中,經消毒處理后,用接種針鉤取袋內色澤純、長勢旺的菌絲體,接種在試管斜面培養基中央,待萌發菌絲后,同樣獲得菌種。
        4、適溫培養通過上述不同方式將菌種分離接種于試管后,要及時將試管移入已消毒的培養箱或培養室內培養,溫度控制在25℃左右,使分離獲得的孢子或菌絲在適溫下發育。
        一般孢子彈射3--4天后孢子萌發成菌落,10天后菌絲長滿管;組織分離接種后2--3天,菌絲即萌發,并在培養基上蔓延生長;菇木分離接種后,7天菌絲即恢復生長。
        5、選育提純通過上述方法得到的菌絲,不一定都是優質的,還需要選育提純。因此,在菌絲萌發后,要認真觀察,挑選色澤純、健壯、長勢正常、無間斷的菌絲,在接種箱內連同培養基鉤取菌絲,接入另備的試管培養基上。在生化培養箱23--25℃的恒溫條件下,培養7--10天,待菌絲長滿管后,再進行觀察,從中擇優取用,即為“母代”母種。
        6、轉管擴接母代母種可以轉管擴接成“子代”母種。采用同樣的斜面培養基,每支可擴接30--50支子代母種。生產上供應的多為子代母種。它可以再次轉管擴接。一般每支可擴接成20--25支子代母種,但轉管次數不得超過5次。

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